微生物檢測的檢驗(yàn)方法
微生物檢測方法一:沉降法
將盛有培養(yǎng)基的平皿放在空氣中暴露一定時(shí)間,經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)算出其上所生長的菌落數(shù)。此法簡單,使用普遍,由于只有一定大小的顆粒在一定時(shí)間內(nèi)才能降到培養(yǎng)基上,因此,所測得微生物數(shù)量欠準(zhǔn)確,檢驗(yàn)結(jié)果比實(shí)際存在數(shù)量少,并且也無法測定空氣質(zhì)量,所以,僅能粗略計(jì)算空氣污染及了解被測趣味生物的種類。
【檢驗(yàn)方法】
(1)將一直被好的營養(yǎng)瓊脂、查氏培養(yǎng)基及高氏1號三種平板置于待測地點(diǎn),打開皿蓋在空氣中暴露5~10min。
(2)蓋上培養(yǎng)皿蓋,置于℃培養(yǎng)24~45h,根據(jù)平板上所生長的菌落數(shù)計(jì)算出1m?或1L空氣中的細(xì)菌總數(shù)。
(3)計(jì)算,奧梅梁斯基認(rèn)為:在面積為100cm2平板瓊脂培養(yǎng)基表面上,5min降落的細(xì)菌數(shù)經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù)和10L空氣中所含的細(xì)菌數(shù)相當(dāng)。根據(jù)奧氏公式計(jì)算
式中X—每1m?空氣中的細(xì)菌個(gè)數(shù);
式中N—5min降落在平板上,經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后生長的菌落數(shù);
式中r—平皿底半徑。
經(jīng)測定發(fā)現(xiàn),用奧氏公式計(jì)算的浮游細(xì)菌數(shù)比實(shí)測的浮游細(xì)菌少。原因是此公式?jīng)]有考慮塵埃粒子大小、數(shù)量、氣流情況、人員密度和活動(dòng)情況。
微生物檢測方法二:撞擊法
以縫隙采樣器為例,用吸風(fēng)機(jī)或真空泵江含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被抽吸到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)及平板上。狹縫長度為平皿的半徑,平板與縫的間隙有2㎜,平板以一定的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)。通常平板轉(zhuǎn)動(dòng)一周,取出置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)的48h,根據(jù)空氣中微生物的密度可調(diào)節(jié)平板狀動(dòng)的速度。采集含菌高的空氣樣品時(shí),平板轉(zhuǎn)動(dòng)的速度要比含菌zui低的空氣樣品的轉(zhuǎn)速快。根據(jù)取樣時(shí)間和空氣流量算出單位空氣中的含菌量。采樣器的規(guī)格各國不一,可按說明書操作。
微生物檢測方法三:過濾法
該法是抽取定量空氣通過一種液體吸收劑,然后取此液體定量培養(yǎng)計(jì)數(shù)出菌落數(shù)。
(1)將無菌的液體培養(yǎng)基或無菌水與真空泵相連,以每分鐘10L速度取空氣樣并劇烈震蕩,使阻流在液體中的氣溶膠或微生物均勻分散。
(2)吸取上述含菌液體吸收液1mL與融化冰冷卻到45℃左右的營養(yǎng)液瓊脂做傾注培養(yǎng),同時(shí)做三個(gè)平行試驗(yàn),置37℃恒溫箱中培養(yǎng)48h,計(jì)算平均菌落數(shù)。根據(jù)下列公式計(jì)算
式中X—每1m?空氣中的細(xì)菌數(shù);
式中Vs—吸收液體量,mL;
式中Va—空氣過濾量,L;
式中N—每1mL液體培養(yǎng)基中的細(xì)菌數(shù)。
微生物檢測方法四:簡易定量測定法
用無菌注射器定量抽取空氣,將所取空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi)部,經(jīng)培養(yǎng)后,即可定量、定性測定空氣中微生物,此法簡單易行。
(1)將無菌固體培養(yǎng)基融化后,在50℃水浴中保溫備用。
(2)利用50~100mL無菌注射器抽取待測環(huán)境空氣20~100mL。
(3)在無菌操作下,取已融化培養(yǎng)基倒入無菌平皿中,平皿稍作傾斜,將注射器插入培養(yǎng)基深處,緩慢將空氣壓入培養(yǎng)基內(nèi),輕輕搖勻以消除氣泡。待培養(yǎng)基凝固,置于30℃恒溫箱中培養(yǎng)3d后統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)量,推算1L空氣所含菌量。通過菌落形態(tài)定性微生物,如統(tǒng)計(jì)霉菌數(shù)量時(shí)培養(yǎng)的時(shí)間稍許延長。應(yīng)用此法需多做平行試驗(yàn),求其平均值以提高準(zhǔn)確性。